以液体过柱但填料保持湿润为标准,按照说明书参数操作即可。如果整管没有离心下去,可以重复离心几次,或者考虑可能是蛋白浓度过高引起,需要稀释样本后取1-10 μg蛋白上样。
不含。可依据说明书中的相关内容自行加入 iRT。也可以替换成实验室常用的复溶多肽的溶剂。
对于 timsTOF 型仪器(Bruker),溶解多肽至 200 ng/μl,进样 1 μl。若初始样本处理量小于 500 ng 则建议用 5 μl Dissolve B 溶解样本,进样 4 μl; 对于 Orbitrap 型仪器(Thermo)按照样品初始处理量溶解多肽至 1 μg/μl,例如初始处理 10 μg 样本则使用 10 μl Dissolve B 溶解多肽,进样 1~3 μl。若初始样本处理量小于 2 μg 则建议用 5 μl Dissolve B 溶解样本,进样 4 μl。
可以,建议重复使用。需在每次实验结束后将适配器 Adaptor 浸没于无水乙醇中进行超声清洗(专用玻璃烧杯),自然干燥后储存于专用玻璃烧杯并使用锡纸密封,待下次使用。
复溶后需要在3h内使用,不建议保存再用。